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          上海遠慕生物科技有限公司
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          技術支持

          羊ELISA檢測試劑盒說明書

          更新時間:2017-07-21   點擊次數:2474次

          ELISA試劑盒,羊ELISA檢測試劑盒說明書

          上海遠慕生物科技有限公司是家專業從事科研試劑的廠家,本司長期現貨供應進口/國產ELISA試劑盒,動物血清血漿,標準品對照品,染色液,培養基,抗體,蛋白質,細胞株,微生物,實驗耗材,詳細為您講述羊ELISA試劑盒說明書資訊,本司銷售的試劑盒種屬有大鼠ELISA試劑盒,小鼠ELISA試劑盒,羊ELISA試劑盒,馬ELISA試劑盒,人ELISA試劑盒,豬ELISA試劑盒,雞ELISA試劑盒,狗ELISA試劑盒,兔ELISA試劑盒,其他動物試劑盒,了解更多種屬請我司銷售人員!

           

          中文名:羊ELISA試劑盒
          英文名:Rat ELISA Kit
          供應商:上海遠慕
          規格:48t/96t
          保存:2-8℃
          有效期:6個月
          范圍:科研實驗等領域科學研究,不得用于臨床診斷。
          特點:敏感性高、特異性強、重復性好、試劑穩定、易保存,操作簡便。
          用途:用于測定血清,血漿及相關液體樣本中相關含量或活性。
          檢測種屬:大小鼠、人、豚鼠、兔子、豬、犬、牛羊、雞鴨ELISA試劑盒等種屬。
          樣本類型:適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞上清、組織勻漿等樣本。
          ELISA方法被廣泛應用于各種抗原和抗體測定。但ELISA測定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術要求,在檢測過程中除正常反應外,有時常見到一些錯誤的結果。
          引起ELISA測定錯誤結果的原因主要有:
          ①標本因素;
          ②試劑因素;
          ③操作因素。

          羊ELISA檢測試劑盒說明書

          ELISA試劑盒,羊ELISA檢測試劑盒說明書性能:

          1.靈敏度:zui小的檢測濃度小于1號標準品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預期濃度相關系數R值為0.990。

          2.特異性:不與其它細胞因子反應。

          3.重復性:板內、板間變異系數均小于10%。

           

          羊ELISA檢測試劑盒基本原理:
          抗原或抗體能吸附到固相載體表面,并保持其免疫學活性;
          抗原或抗體可通過共價鍵與酶連接形成酶結合物,仍保持其免疫學和酶學活性;
          ③酶結合物與相應抗原或抗體結合后,可根據加入底物的顏色反應來判定是否有免疫反應的存在,而且顏色反應的深淺是與標本中相應抗原或抗體的量成正比例,因此,可以按底物顯色的程度顯示試驗結果。

           

          ELISA試劑盒,液體類標本:

          包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養上清等。

          1)血清:

          室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。

          2)血漿:

          應根據標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。

          3)尿液:

          用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。

          4)細胞培養上清:

          檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/ 分)。仔細收集上清。檢測細胞內的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融,以使細胞破壞并 放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。

          5)組織標本:

          切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。

           

          操作步驟:

          1.使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產生加樣上的誤差。

          2.根據待測樣品數量加上標準品的數量決定所需的板條數。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據自己的數量來定,能使用復孔的盡量做復孔。標本用標本稀釋液1:1稀釋后加入50ul于反應孔內。

          3.加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔、加入待測樣品50ul于反應孔內。立即加入50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時。

          4.甩去孔內液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數增加一次。

          5.每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。

          6.甩去孔內液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數增加一次。

          7.每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。

          8.取出酶標板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應立即測定結果。

          9.在450nm波長處測定各孔的OD值。

          建議使用的實驗方案:

          6號標準品以上的結果為非線性的,根據此標準曲線無法得到的結果。

          上海遠慕供應ELISA試劑盒

          ELISA試劑盒注意事項:
          1.試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。
          2.濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。3  各步加樣均應使用加樣器,并經常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內,如標本數量多,推薦使用排槍加樣。
          3.請每次測定的同時做標準曲線,做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本OD值大于標準品孔*孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(n倍)后再測定,計算時請zui后乘以總稀釋倍數(×n×5)。
          4. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
          5.底物請避光保存。
          6.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.
          7.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
          8.本試劑不同批號組分不得混用。
          9.如與英文說明書有異,以英文說明書為準。

           

          ELISA試劑盒標本的采集及保存:
          1. 血清:全血標本請于室溫放置2小時或4過夜后于1000 x g離心20分鐘,取上清即可檢測,或將標本放于-20-80保存,但應避免反復凍融。
          2. 血漿:可用EDTA或肝素作為抗凝劑,標本采集后30分鐘內于2 - 8° C 1000 x g離心15分鐘,或將標本放于-20-80保存,但應避免反復凍融。
          3. 細胞培養物上清或其它生物標本:1000 x g離心20分鐘,取上清即可檢測,或將標本放于-20-80保存,但應避免反復凍融。
          注:標本溶血會影響zui后檢測結果,因此溶血標本不宜進行此項檢測。

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