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          技術支持

          酶制備的三部曲:提取和分離純化

          更新時間:2022-06-14   點擊次數:777次

          (一)細胞破碎處理

          許多酶都存在于細胞內。為了提取這些胞內酶,首先需要對細胞進行破碎處理。細胞破碎的方法很多,主要包括機械破碎法、物理破碎法、化學破碎法和酶學破碎法等。機械破碎法是指利用搗碎機、研磨器或勻漿器等將細胞破碎。物理破碎法是指利用溫度差、壓力差或超聲波等將細胞破碎?;瘜W破碎法是指利用甲醛、丙酮等有機溶劑或表面活性劑作用于細胞膜,使細胞膜的結構遭到破壞或透性發生改變。酶學破碎法是指選用合適的酶,使細胞壁遭到破壞,進而在低滲溶液中將原生質體破碎。

          (二)提取

          酶 的提取是指在一定條件下,用適當的溶劑處理細胞破碎后的含酶原料,使酶充分地溶解到提取液中的過程。酶的提取方法有過柱法、鹽溶液提取法、堿溶液提取法和有機溶劑提取法等。為了提高酶的提取率和防止酶提取后變性失活,提取過程中必須注意保持適宜的溫度和pH值,并且添加適量的保護劑。

          (三)分離

          提取液中含有多種酶,要想從提取液中分離純化出某一種酶,必須根據這種酶的特性,選擇合適的分離純化方法。酶分離純化的方法很多,可利用酶相對分子質量的大小進行分離純化,如通過透析的方法分離酶等。

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