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          技術支持

          怎么預防胎牛血清培養中出現小黑點?

          更新時間:2023-03-28   點擊次數:363次

          為什么胎牛血清培養中出現黑點?經過詳細分解,遠慕生物得出以下結論,為防止客戶由于操作方面而使黑點生成的辦法。對此一定要做好以下幾點。方可使細胞培養順利。

          (1) 盡可能地減少血清凍融次數。

          (2) 培養基無需 37℃水浴。

          (3) 培養基保持PH 值 7.0- 7.2。

          (4) 嚴格控制配制培養基的水質,容器定期刷洗。

          (5) 掌握細胞傳代的時機,細胞切勿生長過老。

          1、化凍 將血清從-20 度冰箱中取出,室溫(或浸于自來水中)化凍(約需要 30 分鐘至 2 小時,也可放于 4 度冰箱化凍過夜;化凍后若不馬上滅活,可以放入 4 度冰箱中暫時保存)

          2、滅活

          (1)放入室溫的水浴鍋內開始加熱(同時放入一個空的血清瓶,內裝 100ml 自來水,插入一根溫度 計,溫度監控以此為準)

          (2)當溫度計顯示 56 度時,停止加熱,改為間斷加熱,維持 56 度(±0.5 度)30 分鐘(±3 分鐘; 若不小心使溫度上升超過 56 度,則:若仍未超過 60 度,且時間很短,比如不超過 5 分鐘,則仍可使 用;若超過 60 度,或者時間較長,則棄去不用,或者嘗試用于一些普通細胞的培養)

          (3)取出,自然冷卻至室溫(約需 1-3 小時) ,可分裝或-20 度繼續凍存。

           3、分裝

          (1)轉入無菌間,在超凈臺內將血清分裝入 10ml 離心管中(注意預先要將血清輕輕搖動數周、混勻; 用吸液管或吹大管吹出血清時要注意:不要吹出氣泡(血清很粘稠,很容易產生氣泡;如果產生氣泡, 則在酒精燈火焰上過一下) )

          (2)放入-20 度冰箱凍存

          (3)全部操作約需要 4-6 小時

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