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          技術支持

          質??寺≥d體的設計和構建的原則說明

          更新時間:2023-06-01   點擊次數:316次

          ①選擇合適的出發質粒

          出發質粒也叫親本質粒,它應含有質??寺≥d體bi備的元件,如復制起始位點、選擇標記基因、克隆位點、啟動子和終止子等。

          ②正確獲得構建質??寺≥d體的元件

          一般采用限制性核酸內切酶切割出質粒DNA分子,獲得含有某種元件的DNA片段,還可以采用PCR技術從靶DNA中擴增出含某種元件的特異性DNA片段。

          ③組裝合適的選擇標記基因

          構建的質??寺≥d體應該組裝什么樣的選擇標記基因,必須根據要轉化的受體細胞的特性來決定。

          ④選擇合適的啟動子

          為了構建表達質粒的克隆載體,必須組裝合適的啟動子,當設計真核生物的基因須在原核生物中表達式,常改用原核生物或病毒(噬菌體)基因的啟動子,而原核生物基因在真核細胞中表達時,仍可用原核生物基因的啟動子。

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